一、試劑配制
緩沖液:取1包緩沖劑,加入500ml的純凈水,攪拌溶解制成磷酸緩沖液,常溫保存。
顯色劑:取1瓶顯色劑,加25ml磷酸緩沖液溶解,使用時取100μl,4℃冰箱保存。
底 物:取1瓶底物,加12.5ml純凈水或蒸餾水溶解,使用時取100μl,4℃冰箱保存。
膽堿酯酶:無需配制,可直接使用,4℃冰箱保存。
二、樣品提取
取2g果蔬樣品(塊莖類取4g),剪成1cm左右見方碎片,放入小燒杯(或取樣瓶)中;然后加入10ml的緩沖液,振蕩1-2分鐘,靜置2分鐘待測。
三、測試
對照測試:于其中一個專用反應(yīng)瓶中,加入2.5ml緩沖液,再分別加入100μl顯色劑和酶液,混勻,靜置預(yù)反應(yīng)10分鐘,后加入100μl底物,搖勻并立即倒入比色杯中,放入測試通道,按儀器《B》鍵測試1分鐘。
樣品測試:于其它專用反應(yīng)瓶中,加入2.5ml待測樣品液,再分別加入100μl顯色劑和酶液,混勻,靜置預(yù)反應(yīng)10分鐘,后加入100μl底物,搖勻并立即倒入比色杯中,放入測試通道,按儀器《M》鍵測試1分鐘,后讀數(shù)并作記錄。
四、測試結(jié)果的判讀
1、若樣品的抑制率<50.0%時,說明樣品中農(nóng)藥毒性小,樣品合格。
2、若樣品的抑制率≧50.0%時,說明樣品中農(nóng)藥毒性大,應(yīng)復(fù)檢,復(fù)檢的結(jié)果若≧50.0%時,樣品不合格。
3、進(jìn)行復(fù)檢測試時,更好用同一待測液測定,因為同一待測品的不同部位農(nóng)藥含量不同。